Kredity	3
Rozsah	2 / 0 / 0
Examinace	Zk
Jazyk výuky	čeština
Úroveň	magisterský předmět
Garant	prof. Ing. Tomáš Ruml, CSc.

Předmět je zaměřen na pochopení principů manipulací s nukleovými kyselinami a jejich analýzy. Zahrnuje informace o způsobech vnášení genů do různých typů buněk, zjišťování genové exprese, izolace a analýzy produktů exprese. Cílem je podat ucelenou informaci o pestré škále technik genového inženýrství pro orientaci při výběru optimálních metod pro konkrétní aplikaci. Proto jsou zde zahrnuty jak základní metody izolace a modifikace nukleových kyselin, tak speciální aplikace, jako modifikace genů pro identifikaci, či purifikaci genového produktu, studium interakcí proteinů a nukleových kyselin, či genové terapie.

1. Zopakování genetických pojmů.
2. Plasmidové a virové vektory, umělé chromosomy.
3. Produkce a izolace DNA, její analýza.
4. Restrikční endonukleasy, mapování genomu,
5. Modifikace nukleových kyselin pro detekci specifických sekvencí.
6. Vysokokapacitní metody sekvenování DNA.
7. Zásady práce s RNA, subtrakční knihovny.
8. Aplikace polymerasové řetězové reakce: modifikace produktů, řízená mutageneze.
9. Produkce proteinů v mikrobiálních buňkách, fúzní proteiny.
10. Tkáňové kultury a jejich využití pro expresi genů.
11. Princip přípravy transgenních organismů.
12. Detekce produktů genové exprese - metabolické značení, elektroforetické a imunochemické metody.
13. Metody pro studium interakcí proteinů a nukleových kyselin.
14. Genové terapie.

Základní
Ruml T., Rumlová M., Pačes V.: Genové inženýrství; VŠCHT Praha 2002

Doplňková
Green M. R., Sambrook J., Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Fourth Edition); Cold Spring Harbor Laboratory Press 2012